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3. Dechsürden mit gesättigter wässeriger Methylenblaulösung etwa 10 bis
5 Sekunden lang;
4. benen in Wasser.
Der negative mikroskopische Befund in gefärbten Ausstrichpräparaten schließt
nicht aus, daß das Material, aus dem die Ausstrichpräparate angefertigt wurden,
trotzdem Tuberkelbazillen enthält. Ein sicheres Ergebnis liesert nur die Verimpfung
des Materials an Tiere. Deshalb ist die Entscheidung stets vom Ergebnis des Tier-
versuchs abhängig zu machen, wenn der mikroskopische Befund in den gefärbten Aus-
strichpräparaten negativ ist, desgleichen, wenn der mikroskopische Befund irgendeinen
Zweifel läßt, ob etwa in den Präparaten vorhandene tuberkelbazillenähnliche Stäbchen
Tuberkelbazillen sind oder nicht.
b. Verimpfung von Material auf Versuchstierec.
Lungenauswurf und Ausflußmaterial aus der Gebärmutter
können unmittelbar, ohne weitere Vorbereitung, zur Verimpfung auf Versuchstiere
(Meerschweinchen) verwendet werden. Es empfiehlt sich, falls wenig Material zur
Verfügung steht, dieses mit sterilisierter physiologischer Kochsalzlösung so zu ver-
dünnen, daß auf jedes Versuchstier mindestens 2 ccm Impfmaterial entfallen.
ilch ist vor der Verimpfung auszuschleudern, und zwar sind für je ein
Versichster mindestens 20 cem Milch zu verwenden, die in einer Zentrifuge mit
etwa 3000 Umdrehungen in der Minute mindestens ¼ Stunde, in einer Zentrifuge
mit etwa 1500 Umdrehungen in der Minute mindestens /# Stunde lang auszu-
schleudern sind. Der hierbei sich abscheidende Rahm und Bodensatz sind nach Ab-
gießen der Magermilch zu mischen und als Impfmaterial zu verwenden. Stehen
zur Impfung für ein Meerschweinchen 80 cem Milch oder mehr zur Verfügung,
so kann von der Verimpfung der Rahmschicht Abstand genommen werden.
Kot ist vor der Verimpfung zur Abtötung von Begleitbakterien, die Meer-
schweinchen rasch töten können, mit Antiformin zu behandeln. Etwa 30 g des zu
untersuchenden Kotes werden mit 15 cem Antiformin und 55 cem destilliertem
Wasser vermischt, die Mischung wird 2 bis 3 Stunden stehen gelassen und während
dieser Zeit öfters umgeschüttelt. Nach 2 bis 3stündigem Stehen wird die Mischung
u¼ (½/) Stunde lang zentrisugiert und sodann die hierbei in den Zentrifugenröhrchen
von dem Bodensatze sich abscheidende Flüssigkeit abgegossen. Ist dies geschehen, so
wird der Bodensatz mit 10 cem destilliertem Wasser aufgeschwemmt, durch sterilisierte
(ausgekochte) Gaze oder grobe Leinwand geseiht und je die Hälfte der durchgeseihten
Flüssigkeit an Meerschweinchen verimyft.
Die vorgängige Behandlung mit Antiformin kann auch bei Lungenauswurf
und Ausflußmaterial aus der Gebärmutter angewandt werden, wenn sich zeigen
sollte, daß nach Verimpfung dieses Materials hänfiger vorzeitige Todesfälle bei den
Impftieren eintreten. Bei Lungenauswurf und Ausflußmaterial aus der Gebär-
mutter ist jedoch das Autiformin in elwa 5prozentiger Mischung zu verwenden.
