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2. Verfahren, welches auf der Bestimmung des Glykogens beruht.
Diese Bestimmung zerfällt in 3 Theile.
a) Bestimmung des Glykogens.
Man bringt 50g von anhaftendem Fett möglichst befreites, zerhacktes Fleisch in
200 cem kochendes Wasser und erhält in einer Porzellanschale eine halbe Stunde unter
Ersatz des verdampfenden Wassers im Sieden. Dann gießt man die Flüssigkeit vor-
sichtig ab, zerreibt den Rückstand ohne Verlust in einer großen Porzellanreibschale möglichst
fein, bringt ihn in die Flüssigkeit zurück, fügt 2 Kaliumhydroxyd hinzu und läßt auf
dem Wasserbade eindunsten, bis die Flüssigkeitsmenge 100 ccem beträgt. Wenn noch
nicht Alles gelöst oder auf der Oberfläche eine Haut vorhanden ist, bringt man den
Inhalt der Schale in ein Becherglas und erhitzt bei aufgelegtem Uhrglase, bis vollständige
Lösung erfolgt ist. Man muß hierzu 4 bis 8 Stunden erhitzen. Nach dem Erkalten
neutralisirt man mit Salzsäure und setzt abwechselnd tropfenweise Salzsäure und Kalium-
quecksilberjodidlösung (Brücke'sches Reagens)“) hinzu. In dem reichlichen, flockigen Nieder-
schlag ist alles Eiweiß (Pepton 2rc.) enthalten. Man filtrirt den Niederschlag ab?),
nimmt ihn noch feucht vom Filter, rührt ihn in einer Schale mit Wasser, dem einige
Tropfen Salzsäure und Kaliumgquecksilberjodidlösung zugesetzt sind, zu einem dünnen Brei
an und bringt ihn nochmals auf das Filter. Diese Behandlung muß viermal wieder-
holt werden. Man fügt zu den vereinigten Filtraten unter Umrühren die doppelte
Raummenge 96prozentigen Alkohol, läßt 12 Stunden absetzen und filtrirt. Den Nieder-
schlag löst man in wenig warmem Wasser, versetzt nach dem Erkalten mit einigen
Tropfen Salzsäure und Kaliumquecksilberjodidlösung, um Spuren von Eiweiß zu entfernen,
filtrirt und fällt das Filtrat wieder mit Alkohol. Das Glykogen wird auf gewogenem
Filter gesammelt, zunächst mit Alkohol, darauf mit Aether, zuletzt nochmals mit absolutem
Alkohol gewaschen, bei 110 0 getrocknet und gewogen. ·
Das so dargestellte Glykogen muß folgende Eigenschaften besitzen:
1. es muß ein amorphes, weißes Pulver sein,
2. die wässerige Lösung muß eine starke weiße Opalescenz zeigen,
3. die Lösung muß mit Jod eine burgunderrothe Färbung geben,
4. die Lösung darf Fehling'sche Lösung nicht reduziren und weder Stickstoff noch
Asche enthalten.
*) Zu einer 5 bis 10 prozentigen Kaliumjodidlösung wird unter Erwärmen und Umrühren so lange
Quecksilberjodid gesetzt, bis ein Theil desselben ungelöst bleibt, und die Lösung nach dem Erkalten abfiltrirt.
**) Es kommt zuweilen vor, daß die letzten Theile des Eiweißniederschlags sich nicht abscheiden, sondern
in Form einer milchigen Trübung in Lösung bleiben. In diesem Falle versetzt man die Flüssigkeit mit der
doppelten Raummenge 96 bis 98 prozentigem Alkohol, läßt stehen, bis sich der Niederschlag vollkommen absessen
hat, und hebt den Alkohol ab oder trennt ihn vom Niederschlage durch Filtration. Man löst den Niederschlag
in 2 prozentiger Kalilange, neutralisirt und fällt von neuem mit Salzsäure und Kaliumquecksilberjodidlösung,
so lange noch ein Niederschlag entsteht. Jetzt gelingt die vollkommene Fällung stets.
